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新冠核酸快检到底靠谱吗?核酸检测实验室污染问题如何处理?

2021-08-10 14:40:41 作者:华越国际  浏览次数:

新冠核酸快检

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关于“核酸检测技术中的污染问题”

技术控

快速核酸检测技术的使用场景做了限制,主要针对不属于高风险的人群可以使用,那这里的“快速核酸检测技术”到底指的是什么技术呢?我们需要看6月12日发布的另一个文件(上图)现阶段,本指引适用的新冠病毒核酸快速检测为:相对常规的新冠病毒核酸检测,样本检测全过程所需时间明显缩短,且仪器便携式(部分检测系统实现便携式),具有或不具有核酸提取、扩增检测一体化的特点。

在这段定义中最为关键的一句话是“样本检测全过程所需时间明显缩短”,所以这才是问题所在,为什么会明显缩短?这种缩短是不是省略了核酸提取纯化步骤,牺牲了试剂的一些性能所达到的,而仪器便携式是这种牺牲所带来的产品特点。

所以仪器便携式、一体机并不是矛盾所在,而是时间缩短的前提是不是在牺牲着产品的性能。

01 意义深远丨核酸检测的污染

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核酸检测技术有诸多优点,但由于其超高的灵敏度,一旦实验室出现核酸污染,很容易导致假阳性结果,从而影响检测的准确性。

样本处理环节抽提核酸和检测环节扩增产物泄露均会导致核酸污染,飞溅的扩增产物会形成气溶胶漂浮在空气中,粘附到物体表面及检测人员身体 上,随着人员及物料流动而污染整个实验室。

实验室一旦发生核酸污染极难清除,会造成实验室短期内无法开展工作,因此防范和清除核酸污染是分子检测实验室的工作重点。

目前的核酸检测均采用闭管检测以防止开盖形成气溶胶,同时采取严格的物理隔绝法,检测依次分为试剂准备区-样本准备区-扩增区-产物检测区,且逐级压,这些策略都大程度地防止了气溶胶污染,但核酸污染事故依然时有发生。由于核酸检测步骤较多,且多个环节样本直接暴露于空气中,任何一个环节出现一点小纰漏就容易导致整个实验室的污染。即使严格按照规程操作,核酸污染依然无法彻底避免。

国内所有二级以上综合医院都具备了核酸检测能力,大部分医院也设立了PCR实验室,高强度的核酸检测任务已然成为了我们检验人的工作常态,但是,如果一旦出现实验室污染,可能会造成假阳性结果,导致结果不可信,甚至可能会危及实验室工作人员安全。

应对核酸检测实验室污染的最好办法就是防范于未然,今天就带大家了解一下实验中我们如何避免和减少污染的产生以及处理污染。

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在新冠病毒核酸检测过程中 ,

核酸污染主要体现在样本核酸或扩增产物在台面、设备、检测人员表面的核酸残留,以及扩增产物形成的气溶胶。气溶胶由于颗粒较小,若不做处理可长期漂浮在空气中持续影响实验室的检测。

核酸实验室污染的主要原因有:标本污染;试剂污染;产物污染;设备污染;其他污染。

其解决措施 为:标本污染:重新采样进行检测,评估标本前处理环节;

试剂污染:更换新的试剂重新检测评估;

设备污染:设备整体消毒清洁、维护;

产物污染:全面清洁消毒实验室、仪器设备所有实验有关用品。

发现污染,检测工作应立即停止,直到确认消除污染后才能重新开始检测。首先,要查找污染源和明确污染范围。

实验室应通过以下途径及时发现污染 :

1、采用每次检测过程至少3个阴性对照随机置于临床样本中间参与提取全过程。

2、每天对实验室内空气进行采样监测。空气监测范围应至少应包括样本制备区和扩增产物分析区。

3、定期对实验室台面、门把手、仪器设备表面进行取样监测。

4、阳性样本采用另外一到两种更为灵敏且扩增不同区域的核酸检测试剂对原始样本进行复核检测。

然后,根据污染源和污染范围采取有效的去污染措施,结合各种不同方法以达到最佳效果。

02 处理核酸气溶胶污染问题

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想绝对避免核酸检测实验室的污染是不可能的,我们能做的是随时保持警惕,尽早发现,及时处置,最大程度减少损失。   实验室污染的处理:

验室一旦发生污染,检测工作应立即停止,直到确认消除污染后才能重新开始检测。首先,要查找污染源和明确污染范围。然后,根据污染源和污染范围采取有效的去污染措施,结合各种不同方法以达到最佳效果。

1.标本污染生物安全柜的操作台造成局限污染时:

立即用吸水纸覆盖,并使用0.55%含氯消毒剂进行喷洒消毒。消毒液需要现用现配,24小时内使用。

2.标本倾覆造成实验室污染时:

保持实验室空间密闭,避免污染物扩散。立即使用润湿有0.55%含氯消毒剂的毛巾覆盖污染区。必要时(如大量溢撒时)可用过氧乙酸加热熏蒸实验室,剂量为2g/m³,熏蒸过夜;或20g/L过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾,用量8ml/m³,作用1-2小时;必要时或用高锰酸钾-甲醛熏蒸:高锰酸钾8g/m³,放入耐热耐腐蚀容器(陶罐或玻璃容器),后加入甲醛(40%)10ml/m³,熏蒸4小时以上。熏蒸时室内湿度60%-80%。

3.清理污染物时:

严格遵循活病毒生物安全操作要求,采用压力蒸汽灭菌处理,并进行实验室换气等,防止次生危害。

比如离心机离心、剧烈地摇动反应管、PCR开盖、吸样时及移液器的反复吸样等等,会产生空气与液体表面摩擦的,都会产生核酸气溶胶,也就是实验室里(或移液*内)弥漫着含有长短不一核酸片段的小水珠或小颗粒,这些小颗粒沉降(打到)到空白样中会导致最后扩增出了条带。

这些核酸小液滴还会落到实验台面、PCR仪、移液qiang 、qiang 头、盒子等等地方,如果我们不注意,这些核酸小液滴就会日积月累地积聚,这样做实验就特别出现问题比如PCR假阳性。

大面积核酸气溶胶污染非常难以清除,若不采取清理措施,污染会更加严重,长期释放污染核酸,终会导致实验室停工。所以一定要给予重视。

03 品牌推荐 Belimed

Belimed的全球总部设在瑞士楚格州,拥有50多年的历史。我们致力于不断发展技术驱动的产品组合;不断创新,以提高无菌处理部门的可靠性、效率和可持续性。

作为Engineers of confidence,我们通过准确识别和解决客户挑战并优化需求以改善其整体工作环境来建立信任和价值。我们的全套无菌工作流程解决方案包括规划和设计、市场领先的设备、耗材、服务、数据连接、教育和培训。我们的重点是向客户灌输生活、呼吸和信心;让他们能够改善医疗服务并保护患者和员工的生命。

Belimed是总部位于楚格州的工业集团公司 Metall Zug 的一部分。该集团拥有约3000名员工,由五个业务部门组成:感染控制、疗器械、线材加工以及技术集群和基础设施以及其他。Belimed Protect™消毒剂产品具有不同的处理包膜病毒的能力,并且在灭活SARS-CoV-2病毒方面十分有效!

04 产品

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